A necessidade de permanecer em um ambiente hospitalar constitui-se um dos principais fatores desencadeantes de colonização e infecção por microrganismos resistentes aos antimicrobianos. Sabe-se que as bactérias pertencem à microbiota natural do homem, atuando como barreira contra patógenos e doenças. No entanto, durante situações estressantes como a hospitalização e uso de antimicrobianos ocorre o desequilíbrio que propicia mudanças na microbiota, prevalecendo a colonização por microrganismos multirresistentes (MR). O objetivo deste estudo foi identificar a prevalência de colonização por bactérias multirresistentes em crianças hospitalizadas em unidade pediátrica. Trata-se de um estudo de caso, exploratório e prospectivo, realizado por meio do acompanhamento das crianças hospitalizadas nos setores pediátricos (enfermaria e unidade de terapia intensiva) do Hospital Universitário de Londrina PR. Foram coletados swab das crianças na alta hospitalar. Considerou-se como MR os produtores da enzima beta-lactamase de espectro estendido (ESBL), resistentes aos carbapenêmicos, à vancomicina e oxacilina. Este estudo contempla um dos objetivos da pesquisa “Colonização e descolonização por microrganismos multirresistentes do binômio mãe-criança hospitalizado: estudo prospectivo”, financiada pelo CNPq. Foram acompanhadas 174 crianças, sendo 96 (55%) do sexo masculino. A idade variou de 1 a 14 anos, crianças menores de um ano representaram 26% da amostra, entre 1-5 anos, 40%, e maiores de 5 anos, 34%. O período de internação variou de 24 horas a 71 dias, com média de 12 dias. Do total de pacientes seguidos, 39 (22,4%) foram colonizados por bactérias MR no período da hospitalização e apresentaram swab positivo na alta. Foram isoladas 52 espécies MR, entre as espécies identificadas, as Gram-negativas representaram (84,1%) e as Gram-positivas totalizaram (16,9%). Os microrganismos isolados foram Escherichia coli (26,9%), 35,7% eram resistentes aos carbapenêmicos e 64,3% produtores de ESBL; Klebsiella pneumoniae (21,1%) 36,4% resistentes aos carbapenêmicos e 63,6% produtores de ESBL; Enterococcus sp resistente a vancomicina; Staphylococcus aureus resistentes à oxacilina (5,8%). Conclui-se que parcela significativa das crianças hospitalizadas foram colonizadas por bactérias MR durante a sua hospitalização, sendo as bactérias Gram-negativas as mais frequentes.