A refrigeração do leite em torno de 4ºC, permite a multiplicação de psicrotróficos produtores de enzimas proteolíticas e lipolíticas termorresistentes. Pseudomonas spp, e P. fluorescens são relatados como os psicrotróficos de maior frequência e importância em leite refrigerado. O presente trabalho avaliou a população de psicrotróficos e Pseudomonas spp. em leite cru refrigerado de caminhões tanques em uma indústria beneficiadora. As amostras foram coletadas entre 30 de março e 15 de junho de 2015, totalizando 18 amostras de leite (50mL\tanque) correspondente a 6 diferentes municípios do Norte do Paraná. A distância média entre as propriedades rurais e a indústria foi de 230 km. Diluições decimais foram semeadas para pesquisa de aeróbios mesófilos, utilizando o Petrifilm™ AC (37ºC/48 horas). Para psicrotróficos utilizou-se o plaqueamento em superfície em Plate Count Agar (21ºC\25 horas). Para pesquisa de Pseudomonas spp foi utilizando o meio de cultura Pseudomonas Ágar Base com adição de suplemento CFC (30ºC\48 horas). Os resultados foram avaliados através da Análise de variância (ANOVA) e Kruskal-Wallis (p<0,05). A contagem de mesofilos variou de 1,7 x10⁵ e 4,9 x10⁶ UFC/mL e a de psicrotróficos entre 8,4 x10⁵ e 4,2 x10⁶ UFC/mL, sem diferença significativa (p>0,05) entre as cidades. Populações a partir de 10⁶ UFC/mL sintetizam enzimas termorresistentes que promovem alterações no leite e derivados. A população de Pseudomonas spp. variou de 7,1 x 10⁴ e 1,6 x 10⁶ UFC/mL. Foi encontrada diferença significativa (p<0,05) na população de pseudomonas dos municípios de Cruzeiro (1,6 x 10⁶ UFC/ mL) e Campina da Lagoa (7,1 x 10⁴ UFC/mL). Outros fatores além do tempo de estocagem podem influenciar no aumento da população como falhas nas práticas de higiene na ordenha, qualidade da água e higiene do animal. A população média de pseudomonas, em relação a de psicrotróficos, variou entre 4,12 e 90,14%, com média de 30,22%. A população média de psicotrófico foi de 2,1 x 10⁶ UFC/mL e de Pseudomonas spp de 6,4 x 10⁵ UFC/mL, representando 30% da população total de psicrotróficos no leite cru refrigerado. Altas contagens de psicrotróficos e Pseudomonas spp. refletem negativamente na qualidade do leite, vida de prateleira, valores nutricionais e sensoriais do produto final.