Antimicrobianos são utilizados na produção de aves com finalidade terapêutica, profilática e também como promotor de crescimento. No entanto, o uso indiscriminado de antimicrobianos pode levar a seleção de cepas bacterianas resistentes de Escherichia coli patogênica para aves (APEC). APECs normalmente estão envolvidas em surtos de colibacilose em aves, podendo infectar diversos órgãos das aves, prejudicando seu desenvolvimento e levando-as ao óbito. O presente estudo tem por objetivo demonstrar a frequência de resistência aos antimicrobianos em amostras de Escherichia coli isoladas de avestruzes com colibacilose. Foram isoladas 22 amostras de infecção em avestruz, oriundos de criadouros do estado do Paraná, e foi realizado o teste de susceptibilidade aos antimicrobianos por meio do método de disco difusão em Ágar Müeller-Hinton (MHA) segundo Clinical and Laboratory Standards Institute - CLSI, 2015 e Clinical and Laboratory Standards Institute - CLSI, 2008. Os antimicrobianos testados foram: ampicilina, cefazolina, cefoxitina, cefotaxima, ceftazidima, amoxicilina – ácido clavulânico, ácido nalidíxico, ciprofloxacino, norfloxacino, enrofloxacino, nitrofurantoína, tetraciclina, cloranfenicol, gentamicina, sulfonamida e sulfazotrim. Nossos resultados demonstraram uma maior frequência de resistência para tetraciclina (86,4%), seguido de sulfonamida, sulfazotrim e ampicilina (81,8%). Todas as amostras foram sensíveis para amoxicilina – ácido clavulânico, cefotaxima, ceftazidima e cefoxitina. Uma vez que os índices de resistências são crescentes, os resultados encontrados sugerem que os avestruzes podem servir como reservatório de cepas multirresistentes, aumentando o risco de disseminação dos genes de resistência a outras bactérias, tanto para humanos quanto para animais. Dessa maneira, estes dados reforçam a importância de monitoramento e controle quanto ao uso disseminado de antimicrobianos na medicina veterinária, a fim de obter êxito no tratamento e diminuir a possibilidade da transferência de genes relacionados à resistência antimicrobiana.