O Laboratório de Ecologia Microbiana (LEM) da Universidade Estadual de Londrina (UEL) tem desenvolvido diferentes estudos que indicam um alto potencial de alguns metabólitos secundários produzidos por Pseudomonas aeruginosa (Cepa LV.). Tem sido demonstrada a atividade antibacteriana de diferentes extratos metabólicos da Cepa LV. contra isolados multirresistentes de importância clínica (Staphylococcus aureus resistente a meticilina e Klebsiella pneumoniae Carbapenemase), o potencial no controle biológico de patógenos que afetam diferentes tipos de cultivos (Xanthomonas axonopodis pv.citri.; Xanthomonas arboricola pv. Pruni; Xanthomonas axonopodis), assim como o potencial para induzir resistência sistêmica em plantas e no controle de Lactobacillus sp. na fermentação alcoólica. Porém, a concentração obtida dos metabólitos de interesse continua sendo muito baixa, o que se traduz em altos tempos e custos de produção. Assim, torna-se necessária a procura de processos produtivos mais eficientes para suportar tanto as atividades de pesquisa quanto para desenvolver um produto que possa ser mais atrativo comercialmente. O presente trabalho foi feito com o objetivo de melhorar a produtividade de metabólitos extracelulares de P. aeruginosa (Cepa LV.) de possível interesse comercial. Por um delineamento estatístico de um fator por vez, avaliou-se a concentração de inoculo (em %v/v: 0.01, 1.0, 2.0, 4.0), peptona (em g/L: 2.0, 5.0, 8.0), extrato de carne (em g/L: 1.2 1.8, 2.4) e CuCl₂.2H₂O (em mg/L: 5.0, 10.0, 15.0). Logo, foi feita a otimização do meio de cultura mediante delineamento experimental Box-Benhken para três fatores; peptona (em g/L: 5.0, 10.0, 15.0), extrato de carne (em g/L: 2.0, 5.0, 8.0) e CuCl₂.2H₂O (em mg/L: 0.0, 5.0, 15.0). Os resultados indicaram um incremento entre 3 e 40 vezes nas concentrações dos metabólitos testados em comparação com o meio de produção utilizado nos estudos anteriores, e favorecem a realização de outros estudos que permitam a utilização de substratos mais econômicos, bem como a determinação de parâmetros de operação em sistemas de fermentação de maior volume.