O nitrogênio é considerado um dos nutrientes mais requeridos pela cultura do milho e que está relacionado com a sua produção. A fixação biológica do nitrogênio (FBN) usando microrganismos é uma alternativa sob os aspectos econômico e ambiental, com resultados promissores em alguns estudos como exemplos conhecidos de interações marcantes entre cianobactérias e eucariotas. Assim objetivou-se avaliar o índice de clorofila em folhas de milho inoculado com duas cianobactérias em quatro níveis de adubação nitrogenada. A pesquisa foi realizada no Instituto Agronómico Paraná em um Latossolo Vermelho eutroférrico, segundo classificação de Köppen, do tipo Cfa - subtropical úmido. O cultivar de milho usado foi a variedade IPR 164 do IAPAR. Foram testados 16 tratamentos utilizando-se o delineamento experimental em blocos casualizados com quatro repetições, em arranjo fatorial 4x4, correspondente a quatro níveis de adubação 0, 50, 100 e 150 kg N ha^-1 da recomendação, combinando com quatro inoculantes, sendo tratamento controle sem inoculação, dois a partir das cianobactérias Anabaena cylindrica e Nostoc muscorum e um inoculante comercial Azospirillum brasilense. As sementes foram tratadas momentos antes da semeadura com os inoculantes segundo o tratamento. As parcelas foram constituídas de seis linhas de semeadura com seis metros de comprimento e 4 m de largura, sendo a área útil de cada linha 24 m², com espaçamento entre linhas 0,80 m e espaçamento entre plantas de 0,14 m. A semeadura foi realizada manualmente, no sistema de plantio direto. A adubação nitrogenada (fonte ureia) no plantio foi de 20 kg de N ha^-1 para todos os tratamentos e de cobertura foi realizada aos 35 dias após a emergência das plântulas, com aplicação de N segundo cada tratamento. Após o estádio R1 (florescimento), foi avaliado o teor relativo de clorofila na folha índice, mediante leitura ICF (Índice de Clorofila Falker), com clorofilômetro clorofiLOG. Observou-se que existem diferenças significativas no ICF para o teste de Tukey (p<0.05) nos tratamentos, destacando na dose de 0 kg N ha^-1A. cylindrica (38,32) e A. brasilense (38,92); na dose de 50 kg N ha^-1N. muscorum (38,98), A. brasilense (39,03) e A. cylindrica (39,63); com dose de 100 kg N. muscorum (40,60) e A. cylindrica (43,38) e na dose de 150 kg N ha^-1N. muscorum com 42,87 de ICF.