A serapilheira é um dos principais componentes do ecossistema florestal e se encontra na camada mais superficial do solo. Neste local, graças à biomassa vegetal acumulada, a celulose é o composto mais abundantemente encontrado, o que faz deste microambiente um possível bom local para a prospecção de enzimas celulolíticas de origem microbiana. O objetivo deste trabalho foi quantificar a atividade da enzima celulase em dois nitossolos com espessuras de deposição de serapilheira contrastantes, ambos localizados no Horto Florestal da Universidade Estadual de Londrina (UEL). O local 1 (23˚19’38’’) possuía menos serapilheira e o local 2 (23˚19’36”) possuía mais serapilheira. Amostras desses dois locais (1 g) foram incubadas com 25 mL de tampão acetato pH 7 e 0,5 g de carboximetilcelulose (CMC) em um banho-maria com agitação constante por 24 h (40˚C e 120 rpm), sendo então o sobrenadante obtido após centrifugação (10 min. 12.000 RCF) utilizado para determinar a atividade da celulase (endoglucanase), através do método do ácido 3,5-dinitrosalicilico (DNS). Os valores de atividade da enzima celulase foram obtidos a partir de uma curva de calibração padrão construída com D-Glicose Anidra (500 µMol/mL) sendo a quantidade de açúcar redutor relacionado aos valores de absorbância obtidos a 520 nm. Os resultados foram então expressos em g/L e em U (1 unidade de atividade enzimática foi considerada igual à produção de 1 µmol de açúcar redutor por mL/min) e submetidos ao teste t de Student a 5% através da ferramenta online T-Test Calculator (http://www.mathportal.org). A atividade de enzimas celulolíticas no solo 1 foi de 0,4 g/L ou 133,33 U e no solo 2 - 13,16 g/L ou 4.388,66 U (t = -191,5). Conclui-se que o solo 2 é um ambiente adequado para a prospecção de enzimas celulolíticas de origem microbiana, já que apresentou valores expressivos de produção desta enzima, inclusive se comparado com outros relatos já disponíveis na literatura científica.