COMPOSTOS BIOATIVOS CONTRA Xanthomonas citri subsp. citri: UMA ALTERNATIVA NO COMBATE AO CANCRO CÍTRICO
1Departamento de Bioquímica e Microbiologia, Universidade Estadual Paulista “Júlio de Mesquita Filho” - Unesp, São Paulo, Brasil. 2Departamento de Química e Ciências Ambientais, Universidade Estadual Paulista "Júlio de Mesquita Filho" - Unesp, São Paulo, Brasil. *e-mail: [email protected]
Um dos maiores desafios do setor da citricultura é o combate a doenças que acometem variadas espécies de Citrus, dentre elas o cancro cítrico. Esta é causada pela bactéria Xanthomonas citri subsp. citri (Xac), considerada praga quarentenária A2, bacilo Gram-negativo aeróbico obrigatório. Até o momento, não há nenhum tratamento eficaz que substitua a inspeção e eliminação da planta contaminada bem como pulverização com soluções cúpricas, num raio de 30 metros. Contudo, o desenvolvimento de novos compostos para combater Xac se faz necessário e desperta o interesse de grupos de pesquisa, para não somente prevenir a iminente disseminação da doença e danos econômicos para a citricultura, como também impedir o acúmulo de compostos tóxicos e cumulativos, como o cobre, no solo, planta e consumidores. Sendo assim, este trabalho fundamentou-se no estudo do potencial anti-Xac de um composto sintético, denominado MA1 e desenvolvido, ineditamente, em colaboração com o Instituto de Química da UNESP de São José do Rio Preto. Para tal fim, a ação antimicrobiana de MA1 contra Xac foi testada utilizando o método REMA, onde a maior concentração do composto testada era 100µg/mL e a menor 0,78µg/mL. Ao final do teste era aplicado o corante resazurina que quando metabolizada é reduzida a resofurina e emite uma fluorescência captada no scanner de fluorescência Synergy H1 microplate reader (Biotek). Foram realizados vários testes independentes sendo possível quantificar a porcentagem de células mortas em função das concentrações de MA1 testadas e, posteriormente, foram determinados os valores de MIC90 e MIC50 (Miníma concentração inibitória para 90% e 50% de células, respectivamente) bem como o teste MBC (Mínima concentração bactericida). Finalmente foram estudados os possíveis mecanismos de ação do composto testado realizando-se testes com kit LIVE/DEAD (Invitrogen) para verificar ação em membrana plasmática e microscopia de fluorescência para verificar se o composto atuou em proteínas formadoras de septo de divisão celular. Concluiu-se que MA1 é eficaz contra Xac apresentando MIC90 de 40,58 µg/mL, ação bactericida a partir de 50µg/mL além de agir tanto na membrana plasmática quanto em septo de divisão celular, apesar de estarem sendo realizadas análises visando verificar qual seria o alvo primário e secundário.