Prado, D. B.¹*; Fernandes, M. S.¹; Anjos, M. M.¹; Nakamura, C. V.²; Abreu Filho, B. A².¹Programa de Pós-Graduação em Ciência de Alimentos, Universidade Estadual de Maringá, Paraná, Brasil. ²Professor Associado do Departamento de Ciências Básicas da Saúde, Universidade Estadual de Maringá, Paraná, Brasil. *E-mail: [email protected]

Alicyclobacillus spp. é uma bactéria esporulada, acidotermorresistente que frequentemente está associada à deterioração de sucos de laranja reconstituídos. Uma das formas de contaminação de Alicyclobacillus spp. em plantas industriais de processamento de suco de laranja é a partir da formação de biofilmes em superfícies que contatam diretamente com o produto, como o aço inoxidável. O objetivo deste trabalho foi avaliar a capacidade de diferentes cepas de A. acidoterrestris formarem biofilmes em superfície de aço inoxidável. Foram avaliadas, em experimentos independentes, 4 cepas de A. acidoterrestris: CBMAI 0267, CBMAI 0277, CBMAI 0283 e CBMAI 0291. O suco de laranja reconstituído em água destilada estéril (12 °Brix) contaminado com 10⁴ UFC/mL de micro-organismo foi utilizado como meio de cultivo. Os cupons de aço inoxidável AISI 304#4 foram imersos assepticamente em eppendorfs contendo 1 mL em suco de laranja. A cada tempo (0, 1, 3 e 5 dias) e temperatura de contato (28 e 45 ºC), os cupons de aço inoxidável foram imersos em solução salina 0,85% por 1 minuto. Em seguida, foram repassados em uma nova solução salina 0,85% e submetidos a banho ultrassônico por 5 minutos. Para a contagem de esporos, logo após, os cupons foram submetidos a um choque térmico de 80 °C por 10 minutos. O plaqueamento foi realizado em ágar BAT com incubação a 45 °C por 24-48 h. As cepas de A. acidoterrestris 0267, 0283 e 0291 formaram biofilme em superfície de aço inoxidável para as duas temperaturas avaliadas. Entretanto, a cepa 0277 não formou biofilme em nenhuma condição avaliada. Após 5 dias de contato, as contagens de A. acidoterrestris 0267 e 0283 foram maiores (5,7 log e 5,19 log UFC/cm², respectivamente) à 28 ºC do que à 45 ºC (4,89 log e 4,37 UFC/cm², respectivamente). Observou-se o contrário para a cepa 0291; após 5 dias de contato, maiores contagens foram observadas à 45 ºC (5,80 log UFC/cm²) do que à 28 ºC (4,34 log UFC/cm²). Além disso, as cepas 0267 e 0283 esporularam ao longo do tempo, confirmado pelo choque térmico, para ambas as temperaturas com contagens entre 3,19 e 5,19 log UFC/cm². A cepa 0291 formou biofilme na forma de esporos apenas na temperatura de 45 ºC com contagem de 4,64 log UFC/cm². Os resultados demonstraram o comportamento variado das cepas de Alicyclobacillus acidoterrestris em formarem biofilme, embora pertençam a mesma espécie.