Microrganismos como fungos e bactérias podem crescer em fluidos de corte miscíveis em água, o que pode ocasionar problemas de saúde, perdas econômicas em função da alteração das propriedades lubrificantes e anticorrosivas, o que leva a substituição frequente do fluido para que a qualidade no processo de usinagem seja mantida. Do exposto, o objetivo deste trabalho foi quantificar, isolar e identificar bactérias heterotróficas e potencialmente patogênicas presentes em fluido de corte em uma máquina ferramenta. Para a caracterização foram realizadas coletas de fluido de corte em uma máquina ferramenta de uma indústria de usinagem. Para cultivo das bactérias heterotróficas (BH) foi utilizado o meio Brain Heart Infusion (BHI) e para o cultivo das bactérias potencialmente patogênicas (BPP) foi utilizado o meio de cultura CHROMagar Orientation. As placas de Petri inoculadas foram incubadas à 35⁰C por 24h. Após este período foi realizada a contagem das Unidades Formadora de Colônia (UFC). As colônias que cresceram no meio de cultura CHROMagar Orientation também foram analisadas quanto a coloração diferencial promovida pelo meio de cultura e isoladas para realizar a caracterização morfotintorial utilizando a coloração de Gram. A concentração de BH obtida foi de 1,63x10⁷ UFC/mLe de BPP foi de 1,42x10⁷ UFC/mL, o que representa cerca de 87% do total de bactérias presentes no fluido de corte. Do cultivo em meio CHROMagar Orientation e caracterização morfotintorial das colônias, foi possível identificar 6 tipos de bactérias potencialmente patogênicas: Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Enterobacter cloacae, Acinetobacter spp., Enterococcus faecalis e Proteus mirabilis. A maior concentração de bactérias patogênicas foi representada pela bactéria Escherichia coli (40%), em seguida por Staphylococcus aureus (16%); Enterobacter cloacae (15%); Acinetobacter spp. (13%); Enterococcus faecalis (11%) e Proteus mirabilis (5%). Dos resultados contata-se que a concentração de microrganismos presentes no fluido de corte é elevada, o que demostra que no mesmo deve ser realizado um controle mais efetivo para eliminação destes, visto que as BH estão relacionadas a degradação do fluido de corte e as BPP podem causar doenças no trato intestinal e na pele dos trabalhadores das indústrias de usinagem.