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AVALIAÇÃO DO EFEITO ANTIMICROBIANO DE METABÓLITOS SECUNDÁRIOS DE FUNGOS DA ANTÁRTIDA EM Xanthomonas citri subsp. citri.

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O interesse pelo uso em práticas agrícolas de metabólitos bioativos produzidos por microrganismos vem aumentando, se constituindo em potenciais substitutos de produtos químicos. Neste contexto, os metabólitos secundários são de grande interesse como possíveis alternativas para o combate de Xanthomonas citri subsp. citri, fitopatógeno responsável pelo cancro cítrico. O objetivo dessa pesquisa foi obter extratos metabólicos produzidos por fungos e avaliar a atividade desses extratos contra a Xanthomonas citri subsp. citri. Os fungos filamentosos utilizados nesse estudo foram coletados na Ilha Deception na Antártica em amostras de solo contendo madeira em decomposição. Para a produção dos metabólitos secundários os fungos foram cultivados em meio de cultura ágar malte 2% a 15ºC por 7 dias, após crescimento, os microrganismos foram inoculados em erlenmeyers contendo meio de cultura malte 2% líquido e colocados sob agitação a 15ºC e 150 rpm por 20 dias. Após separação entre biomassa e fase líquida, os metabólitos secundários foram extraídos do meio extracelular e intracelular com acetato de etila e metanol, respectivamente, e concentrados por evaporação. Os extratos foram dissolvidos em dimetilsulfóxido (DMSO) 10%, ficando com uma concentração de 30 mg/mL. Inóculo contendo Xanthomonas citri subsp. citri foi preparado em meio Nutrient (N) a 29ºC e 200 rpm overnight para bioensaio. A atividade antimicrobiana dos extratos contra a bactéria foi analisada através do método Resazurin Microtiter Assay (REMA) com concentração inicial de 2,1 mg/mL; para controle positivo utilizou-se canamicina (20 µl/mL), DMSO 1% para controle do veículo e meio de cultura N com Xanthomonas citri subsp. citri para controle negativo. Através da análise de fluorescência do corante rezasurina foi possível quantificar as células mortas do fitopatógeno. Considerou-se efetivas as amostras cuja porcentagem de morte celular foi igual ou superior à média do controle positivo, 87%. Extratos intracelulares produzidos por 8 fungos apresentaram efeito antimicrobiano com média de inibição de 92%. Extratos extracelulares de 5 fungos apresentaram média de inibição de 90%. Novos ensaios deverão ser realizados para comprovação dos resultados. Os extratos que foram eficientes contra a bactéria Xanthomonas citri subsp. citri serão purificados e seus componentes serão avaliados quanto à ação antimicrobiana.