O consumo de probióticos exerce efeitos benéficos para a saúde humana, impedindo a colonização e invasão de patógenos no intestino. Além disso, podem produzir compostos com atividade antimicrobiana, bacteriocinas, podendo inibir o crescimento de bactérias patogênicas. Os lactobacilos (gênero Lactobacillus) são os principais agentes probióticos utilizados na prevenção de infecções e na restauração da microbiota intestinal. Salmonella enterica sorovariedade Typhimurium é um importante agente causador de infecção intestinal de origem alimentar, responsável por uma alta morbidade principalmente nos países em desenvolvimento. O objetivo deste trabalho foi avaliar a capacidade protetora do Lactobacillus sp produtor de exopolissacarídeos (EPS) contra a S.Typhimurium. Para a realização dos testes, inicialmente realizou-se a extração do sobrenadante. A cepa de Lactobacillus, foi semeada em caldo Man Rogosa Sharpe (MRS) à 37ºC por 18 horas. Após o seu crescimento, foi centrifugado obtendo-se o sobrenadante, em seguida foi filtrado com membrana de microporos de 0,22μm. A partir da obtenção do sobrenadante foi determinada a concentração inibitória mínima (CIM), pelo método de microdiluição. Foi realizado o ensaio de crescimento e morte em diferentes tempos, e concentrações de sobrenadante (10 e 20%) contra S. Typhimurium. Por fim, para verificar se o Lactobacillus sp é produtor de bacteriocinas, foi utilizado o método de antagonismo, “spot on the lawn”. Alíquotas da cultura de lactobacilo são adicionadas (forma de pontos) em placas de Petri contendo ágar MRS, após a completa secagem, é incubada por 18h; em seguida é adicionado ágar semissólido com S.Typhimurium e incuba-se a 37°C por 12 horas. A CIM do sobrenadante foi de 5% contra S.Typhimurium. A curva de crescimento e morte, constatou que à 10% o sobrenadante teve ação bacteriostática e a 20% ação bactericida. O método de antagonismo mostrou que os lactobacilos produzem bacteriocinas capazes de inibir o crescimento de S.Typhimurium formando um halo de inibição de 21 mm de diâmetro. Este estudo mostra que um dos prováveis mecanismos de ação do Lactobacillus sp é a produção de bacteriocinas inibindo o crescimento de patógenos, sendo de grande importância na prevenção de infecções intestinais.