A mastite bovina tem como característica uma inflamação da glândula mamária, responsável por alterações físicas, químicas e bacteriológicas no leite e/ou alterações no tecido glandular. É contagiosa e apresenta baixa porcentagem de cura espontânea. O uso de antibióticos no tratamento da mastite bovina é preocupante para a indústria e para a saúde pública devido os níveis destes medicamentos no leite. O objetivo desse trabalho foi avaliar as propriedades biológicas do extrato etanólico da casca de Punica granatum e óleos essenciais obtidos a partir de espécies da família Myrtaceae para o saneamento e tratamento da mastite bovina ambiental, utilizando as amostras de bactérias ATCC: Staphylococcus aureus (ATCC 6538); Escherichia coli (ATCC 8739); Streptococcus agalactiae (ATCC 12386). A metodologia utilizada foi da difusão do disco em Agar conforme as normas do Comitê Europeu (EUCAST). A extração dos óleos essenciais das espécies Myrrhinium atropurpureum, Eugênia rotundifolia foi realizada utilizando aparelho de Clevenger. Foi utilizado o extrato etanólico da casca de Punica granatum. Foram realizadas diluições seriadas (90%, 50%,12%, 6% e 3%) dos óleos em presença de 0,5% Tween 80. Os resultados representam diâmetros dos halos em milímetros (mm). O óleo da espécie M. atropurpureum não teve atividade bactericida contra nenhuma das espécies bacterianas testadas. Óleo da espécie E. rotundifolia apresentou atividade antibacteriana contra E. coli nas concentrações de 90% (8mm), 50% (8mm) e 12% (7mm), nas concentrações de 90%(17mm) e 50% (11mm) para S.aureus e somente 90%(9mm) para S. agalactiae. A concentração mínima inibitória do extrato da casca de P. granatum para as três cepas testadas foram de 1mg/mL (13mm) para E. coli, para S. agalactiae de 75mg/mL (10mm) e de 37mg/mL (11mm) para S. aureus. Foi observado que o extrato de P. granatum na concentração de 75mg/mL teve atividade bactericida para as três cepas testadas. Embora estes resultados ainda sejam preliminares, nos estimula avaliar a aplicação do óleo da espécie E. rotundifolia e extrato de P. granatum no tratamento da mastite bovina.