Espécies do gênero Cryptococcus estão presentes no ambiente em excretas de aves e matéria orgânica em decomposição. C. neoformans e C. gattii são as principais espécies patogênicas, que acometem principalmente indivíduos imunossuprimidos. Poucos antifúngicos estão disponíveis para o tratamento dessas infecções, tendo como principais limitações a alta toxicidade, elevado custo e a seleção de cepas resistentes. Em vista disso, os objetivos desse trabalho foram avaliar o perfil de sensibilidade de C. neoformans e C. gattii a antifúngicos comerciais (fluconazol e anfoterecina B) e substâncias naturais (eugenol e nanopartícula de prata - AgNPbio - produzida pelo fungo Fusarium oxysporum). Para isso, foram utilizadas as cepas de referência, C. gattii ATCC 56990 e C. neoformans ATCC 66031, três isolados ambientais (dois C. neoformans e um C. gattii) obtidos a partir de excretas de pombos da cidade de Londrina e um isolado clínico de C. gattii oriundo de um Hospital Escola de Londrina. A Concentração Inibitória Mínima (CIM) e a Concentração Fungicida Mínima (CFM) das substâncias sintéticas e naturais foram determinadas pelo método de microdiluição em caldo RPMI-MOPS e contagem direta de unidades formadoras de colônias em ágar Sabouraud, respectivamente. Ambas as espécies foram sensíveis à anfotericina B (CIM ≤ 1 µg/ml), enquanto os isolados de C. gattii foram resistentes ao fluconazol (MIC ≥ 8 µg/ml). As CIMs e CFMs do eugenol variaram de 0,0625% a 0,5%, sendo os menores valores observados para C. neoformans ATCC 66031 e isolado clínico de C. gattii, e os maiores para os isolados de C. neoformans. O menor valor de CIM de AgNPbio foi observado para o isolado de C. neoformans (7,8 µM) e o maior para C. gattii ATCC 56990 (62,5 µM). A CFM de AgNPbio foi maior que 500 µM para as cepas de referência e isolado ambiental de C. gattii. Esses resultados mostram diferentes perfis de sensibilidade aos antimicrobianos comerciais e substâncias naturais entre as espécies estudadas. Além disso, a atividade antifúngica das substâncias naturais sugere que as mesmas podem ser estudadas como estratégia alternativa no tratamento de infecções por Cryptococcus.