Anais do Congresso Paranaense de Microbiologia
Anais do III Congresso Paranaense de Microbiologia

Ambientes aquáticos podem servir de reservatório para Enterococcus resistente a Vancomicina (VRE), uma vez que estes ambientes podem fornecem a transferência e disseminação de genes resistência. Em decorrência, a água se torna uma via de transmissão de VRE para seres humanos. O objetivo deste estudo foi investigar a transferência por conjugação do gene vanA entre isolados de Enterococcus, em água de consumo humano, água lacustre e água destilada. Foram utilizados um total de 6 isolados de Enterococcus que tiverem seu perfil fenotípico e genotípico previamente estudados pelo grupo, são eles: 4 E. faecium (924, 1114, 1227 e 1295) resistentes a vancomicina (MIC ≥ 32μg/mL ) como potenciais doadores do gene de resistência plasmidial vanA e como potenciais receptores foram utilizados 2 E. fecalis (872 e 906) resistentes à tetraciclina (MIC ≥16μg/mL) e produtores de gelatinase. Os isolados tiveram sua densidade celular ajustada e foram inoculados na razão de 1:1(doador: receptor), em água de consumo humano, água lacustre e água destilada, incubados a 37ºC, sob leve agitação. Após 2 horas, uma alíquota foi retirada e semeada em meio de cultura contendo os antimicrobianos marcadores tetraciclina (16μg/mL) e vancomicina (32μg/mL). Os isolados transconjugantes foram avaliados quanto a presença do gene vanA e dos marcadores seletivos gelE e tetL. A exclusão da aquisição do gene via mecanismos de transdução foi realizada submetendo os isolados doadores a fervura e empregado-os nos ensaios de conjugação. Um total de 10 isolados transconjugantes provenientes de diversos pares foram avaliados quanto a estabilidade plasmidial. A maior frequência de conjugação foi 0,67x10-5 UFC/ml com o par conjugativo Efs 872/VR-Efm 924 após 2 horas em água de origem lacustre; e a menor freqüência foi 0,39x10-5 UFC/ mL com o par conjugativo Efs 872/VR-Efm 1295 em água destilada. A estabilidade plasmidial alcançou 93% com o par Efs 872/VR-Efm 924. Não foi observado crescimento celular em meio com e sem seleção dos isolados empregados no teste de doador morto. A capacidade dos isolados testados em nosso estudo em transferir o gene vanA via processo conjugativo atingiram valores de alta frequência corroborando com a literatura o que indica que a água é um ambiente potencial para a transferência de genes de resistência por conjugação entre bactérias e no caso do presente estudo entre bactérias do gênero Enterococcus.