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Objetivou-se avaliar os parâmetros sanguíneos de vacas da raça Holandês em lactação submetidas a diferentes níveis de inclusão de grãos secos de destilaria com solúveis (DDGS) de milho na dieta. O experimento foi conduzido no setor de Bovinocultura de Leite da Estação Experimental da Unioeste. Os animais foram distribuídos em um delineamento experimental em quadrado latino 5x5. Para a avaliação dos parâmetros sanguíneos, no 21° dia do período experimental foi realizada a coleta de sangue em jejum e quatro horas após a alimentação. Houve efeito linear crescente para colesterol em jejum e quatro horas após a alimentação (P<0,05). Para creatinina, houve efeito linear decrescente (P<0,05) para os níveis de inclusão de DDGS na dieta em jejum, e para 4 horas após a alimentação. Os grãos secos de destilaria com solúveis DDGS de milho podem ser utilizados na alimentação de vacas em lactação até o nível de 32% de inclusão na matéria seca, sem alterar o perfil metabólico dos animais.