Desenvolvimento de anticorpos IgY contra Streptococcus equinus cepa JB1
A Streptococcus equinus produz ácido lático e provoca acidose ruminal e pode ser controlado por anticorpos de galinhas. Poedeiras brancas Leghorn com 25 semanas de idade foram imunizadas com vacinas contendo Streptococcus equinus strain JB1 isolada do fluido ruminal. A bactéria foi ativada e placas de cultura por 24–48 horas a 37°C sobre condições semi-anaeróbicas. As colonias foram coletadas através de alçadas e transferidas assepticamente para tubos de 3 mL com solução salina. A solução salina contendo antigenos foi misturada (50:50) com adjuvantes (35 mL PBS mais 175 mg Al(OH)3). A mistura foi aquecida a 60°C por 40 minutos para inativação. A vacina foi transferida para tubos estéreis, fechada e estocada a 4°C até o momento do uso. 500 microlitros da vacina foi inoculada de forma intramuscular no peito de 80 poedeiras. Os ovos foram coletados diariamente de 5 a 30 dias após a imunização, quebrados e separados em casca, clara e gema. Depois a membrana vitelinica foi rompida e a gema foi submetida a delipidação e liofilizada. As amostras foram analisadas quanto a concentração de imunoglubulinas IgY usando um kit ELISA específico. Os níveis de IgY aos 5, 10, 15 e 30 dias após a imunização foram 256, 298, 306 e 271 mg/gema, respectivamente. Nós concluímos que a imunização com S equinus foi efetivo na produção de anticorpos.