Proceedings of Oncobiology Symposiums
Proceedings of XIV Oncobiology Symposium

Boa tarde, Leonardo! Agradeço pelas felicitações e pela sua pergunta. Avaliamos os efeitos desses compostos tanto em linhagens tumorais humanas, quanto em linhagens não-tumorais de epitélio intestinal murino. Observamos que ambos compostos apresentam efeito seletivo sobre células tumorais, já que não afetaram parâmetros como viabilidade, proliferação, migração, diferentemente das células tumorais que foram fortemente afetadas por ambos compostos. 

Eu que agradeço pelo retorno.

Essas células são linhagens imortalizadas.

Olá, Luciana! Obrigado pelas felicitações e pela pergunta. 

Esse estudo é parte da minha tese de doutorado, onde avaliamos os efeitos de ambos compostos de maneira isolada em linhagens tumorais e não tumorais, e identificamos um efeito seletivo dessas moléculas nas linhagens tumorais, uma vez que não houve alteração de viabilidade, proliferação ou migração das linhagens não tumorais. Também avaliamos os efeitos antitumorais de ambas moléculas em modelos in vivo de embriões de Xenopus laevis e em camundongos submetidos ao protocolo de indução tumoral por AOM/DSS, que mostrou que lonchocarpina reduz a proliferação celular nos adenocarcinomas colorretais. Atualmente, tenho estudado o papel da inibição seletiva da via Wnt sobre linhagens tumorais de cólon submetidas ao tratamento com 5-FU em um contexto de quimioresistência, e pretendo testar essas combinações tanto in vitro quanto in vivo. 

Olá, Araci! Muito obrigado pelas felicitações e pelas perguntas.

Nessa primeira fase dos testes, eu avaliei essas combinações apenas em modelo 2D, mas pretendo expandir as análises tanto para modelo 3D de organoides tumorais, e também em tumores induzidos em camundongos. 

Quanto ao segundo questionamento, o "B/R" trata-se da construção em que as células SW480 e RKO pBAR/Renilla apresentam expressão constitutiva do gene repórter ativado por β-catenina (pBAR) e do gene repórter de ativação constitutiva (Renilla-luc) e foram geradas por transdução lentiviral dos plasmídeos pBAR (β-catenin activated repórter system) e CMV Renilla. O primeiro, contém a sequência de ligação ao DNA do fator de transcrição TCF da via de Wnt/β-catenina condicionado à transcrição da enzima firefly luciferase, dessa forma, quando há a ligação de β-catenina à TCF, ocorre transcrição dessa enzima. Enquanto o segundo é constituído pelo promotor constitutivo de CMV (citomegalovírus) como controle, e possui ativação independe da via de Wnt/β-catenina, assim como a enzima renilla luciferase. Dessa forma, conseguimos avaliar a modulação da via Wnt/β-catenina através da atividade do gene repórter. 

Eu que agradeço, Araci.

Abraços!