Proceedings of Oncobiology Symposiums
Proceedings of XIV Oncobiology Symposium

Vocês vão testar em algum modelo animal de cancer colon e de glioblastoma?

Olá, boa tarde, Brenda. Isso é novo para mim e gostaria primeiro de saber se você está recebendo essa msg para proceder às perguntas. Obrigado!

Imagino que seja dessa forma mesmo e posteriormente posso avaliar sua resposta. Logo, vou deixar as perguntas aqui então.

1) Você saberia informar a quantidade necessária de injestão de chá-verde necessária para chegar à concentração plasmática que vocês usaram nos ensaios in vitro? Ou seja, quanto de chá-verde ao dia eu conseguiria chegar a 162 ug/ml por exemplo.

2) Na Fig.1, do centro para a periferia, é possível observar que o controle está mais claro que os tratados. Isso significaria dizer que o esferoide parece menos denso que os tratados. Com isso, os tratados teriam mais células que o controle. O controle a que você se refere é a linhagem não tumoral?

3) Na Fig. 2, novamente do centro para a periferia, os tratados estão mais densos que o controle. Vocês conseguiriam avaliar o número de células em cada esferóide após tratamento? Além disso, é importante ressaltar que em baixas concentrações, o GTE favoreceu a viabilidade e que na concentração elevada o mesmo não foi observado. Você conseguiria explicar um motivo pela elevada viabilidade nas baixas concentrações?

4) Na Fig. 3, o mesmo foi observado nas baixas concentrações aumentado a viabilidade na MCF-10A. Você teria alguma teoria, já que foi estatisticamente significativo?

O trabalho é interessante e espero que traga novas ideias para sua carreira científica. Sugiro uma abordagem mais específica sobre os subprodutos presentes no extrato de chá-verde e potencial produção de compostos análogos para serem explorados in vitro.

Oi Thaíssa,

excelente estudo! Parabéns! Quanto a reprodutibilidade dessas partições, como validam? O caminho natural é ir "afunilando" até chegar aos compostos ativos, etc...o grande gargalo dos produtos naturais (tb vivencio isso). Queria saber como discutem isso e como fazem a "transformação" das concentrações do in vitro para o in vivo?

Boa tarde, Thaíssa!

Parabéns pelo trabalho e apresentação!

Na sua apresentação você falou que as plantas do gênero Piper são usadas na medicina tradicional para o tratamento do câncer. Qual a fonte utilizada? Que país utiliza Piper para tratar o câncer e qual tipo de câncer?

Como foi calculado o índice de seletividade?

Em relação a toxicidade em camundongos, foi verificado a pelagem dos animais, peso e alguns marcadores bioquímicos?

Qual foi a sua participação efetiva na obtenção dos resultados?

Olá Paula,

Boa Tarde! Parabéns pelo seu pôster. 

Gostaria de fazer algumas perguntas.

1- Há quanto tempo você desenvolve esse projeto?

2 - Vocês pretendem fazer um co-tratamento utilizando quimioterapia padrão para melanoma e ouabaína?

Obrigada

Paloma Souza

Boa tarde Thayssa,

Parabéns pelo trabalho bastante promissor, tem resultados muito interessantes. Explica um pouco melhor, por favor, esse resultado da Figura 2, essa comparação entre a LNCaP e a PC3. A PC3 também não é tempo-dependente? Qual das duas células você considera que tem um resultado mais interessante e por quê? (levando em consideração que a LNCaP é hormônio-dependente e a PC3 hormônio independente).

Quais são os próximos passos do trabalho? Vocês pretendem explorar os mecanismos pelos quais o LQB-472 age na célula?

Isabel,

quais são as perspectivas com relação aos resultados que você obteve ate o momento?

Você comenta que observou diferenças no perfil químico, dependente do periodo da coleta e da quantidade de material de A. halophytica.

Que fatores você inclui em "periodo da coleta"? Epoca do ano, horário do dia de coleta..?

Vocês pretendem complementar o estudo para inferir um momento e concentração ideal para garantir que o extrato tenha o efeito anticancer?

Boa tarde Isabel,

* Parabéns pelo trabalho! Em relação à figura 1, qual foi o controle utilizado para esses ensaios de MTT?

* Qual foi a concentração utilizada nos experimentos de ciclo celular (Figura 2)?

* Ao que você atribui essa variabilidade das espécies nas três coletas diferentes? Qual foi o período de coleta e como pode afetar a ocorrência das espécies?

* A atividade anti-tumoral da A. halophytica foi eficiente na célula de câncer de mama somente ou na célula de mama e na de glioblastoma também? Qual célula MDA é essa? Especifique, por favor.

* Essa variabilidade química avaliada significa que os compostos são o que, exatamente? Metabólitos das cianobactérias com atividade anti-tumoral? Vocês pretendem avaliar/validar quais desses compostos (isolados ou em combinação) são os responsáveis pelos efeitos anti-tumorais? Vocês pretendem escolher um modelo de câncer para seguir com o trabalho? 

Olá Isabel, boa tarde!

Parabéns pelo trabalho desenvolvido!

O efeito citotóxico desta cianobacteria já foi anteriormente avaliado para outros tipos de câncer?

Porque você escolheu estudar esses 4 tipos como modelo (glioblastoma, pulmão, leucemia e mama)? 

Boa tarde, Michelle!

Parabéns pelo trabalho!

Verificando o resumo e o pôster, notei que não foi apresentado os resultados da PFK e da PK. Além disso, a figura 3 não possui informações sobre qual o teste que está sendo avaliado pela citometria de fluxo, e o que significa as barras pretas, brancas e cinzas.

Foi realizado o ensaio de MTT com as células MDA-MB-231 tratadas com a tintura no modelo 2D, antes de partir para o modelo 3D?

Na figura 4-A, o MTT demonstra que A-V e Q-V reduziram significativamente a viabilidade, porém na figura 4-B, é mostrado os resultados com A-I e P-I, que não reduziram a viabilidade.

Qual foi a sua participação efetiva na obtenção dos resultados? E quais são os próximos passos?

Olá Danilo,

Boa Tarde! Parabéns pelo seu pôster.

Seguem algumas perguntas.

1- Há quanto tempo você está no Doutorado?

2 - Poderia explicar melhor sobre os derivados mesoiônicos?

3 - Quais os efeitos biológicos desses derivados serão avaliados no estudo?

Obrigada

Paloma Souza

* Vocês viram que o C-PC não se liga à p53 e, além disso, ele se liga a BCL-2, entretanto os ensaios in vitro mostraram que C-PC não induz morte celular. O que você acha que pode estar acontecendo? 

* O que é a célula controle? É tratada com algum reagente?

* Essa molécula C-PC já é utilizada em algum ensaio clínico como agente anti-tumoral em algum modelo? E em ensaios in vivo, há estudos que utilizam a P-CP em camundongos? Se sim, sabe a concentração utilizada in vivo? Essa concentração de 400 ug/mL é viável?

* No gráfico A do ensaio de sensibilidade da célula tumoral B16F10 ao P-CP, ficou faltando o asterisco indicando diferença estatisticamente significativa entre o controle e a célula tratada com 400 ug/mL em 72h, ou não colocou porque não há diferença significativa? No próprio abstract você chama a atenção para esta concentração...

* Como você sabe que essas interações proteína-proteína (in silico) entre C-PC e BRAF, MEK1, BCL-2, CDK6 etc... bloqueiam as ações dessas proteínas? 

* Como foi feita exatamente a contagem das células com a exclusão com azul de tripan? As células estavam aderidas? Como você extrapolou essa contagem para todo o poço?

* Como pretendem validar os experimentos com as metaloproteinases?

Não seria interessante comparar o resultado com uma droga referência já que você está fazendo o screening de candidatos a farmacos antitumorais? Se tiver é claro!

Boa tarde, Israel!

Verificando o resumo, o pôster e a sua apresentação, notei que não foi apresentado nenhum resultado. O trabalho está no início?

Quais os compostos que serão utilizados nas nanopartículas?

Como você pretende realizar ensaios in vivo, será avaliada a toxicidade em camundongos (verificação da pelagem dos animais, peso e alguns marcadores bioquímicos)?

Qual será a sua participação efetiva na obtenção dos resultados?

Que tipos de testes pretende fazer para avaliação da morte celular?

A que atribui o resultado com o MB1? Estrutura?

Boa tarde Giulia. Meu nome é María Gabriela e estou avaliando o seu pôster. 

A seguir colocarei algumas perguntas/sugestões sobre o seu trabalho:

• Qual foi o motivo de diminuir a concentração dos componentes de 10uM para 5 uM em algum dos ensaios?
• Os resultados sugerem que o RCP18 não reativa à P53 mutante, porque ainda decidiram continuar realizando experimentos com este composto e não ficar unicamente com RCP17? De fato, é observado no resultado de p21
• Por que usar no ensaio de p21 a concentração de 10uM e não a de 5uM? Será que esse resultado seria mantido na concentração menor
• Está escrito no resumo a realização de ensaio de 3D, quais seriam os experimentos a ser desenvolvidos usando este modelo ?
• Quais seriam os experimentos a ser realizados futuramenter? uma opção poderia ser a realização de um proteoma para ver os efeitos em outras proteínas/vias de uma maneira mais geral.
• Quantas vezes foi repetido o ensaio de p21? Vale a pena fazer o teste estatístico.

Parabéns pelo seu trabalho

Oi Brenda, parabés pelo excelente estudo! Poderia me falar melhor sobre como vocês fazem o teste de viabilidade por alamar blue por favor?

Att

Giselle Faria Lopes

Bom dia,

muito legal o trabalho! Parabéns! Pode explicar um pouco melhor como é feito o teste de estabilidade por MTT por favor?

Att

Giselle Faria Lopes 

Estas substâncias são protótipos candidatos a fármacos ou já são compostos utilizados em ensaios clínicos?

Boa tarde Mariana,

Meus parabéns pelo trabalho, gostei muito da sua apresentação. Você fez análises in silico para determinar os possíveis alvos moleculares de C-PC e verificou que esta proteína se liga a algumas proteínas relacionadas à proliferação, apoptose, migração e metástase; e verificou também que esses efeitos funcionais ocorrem, através de alguns experimentos in vitro. O que mais você faria para corroborar esses experimentos in vitro? Quais são as perspectivas desse trabalho?

Boa tarde meu nome é María Gabriela Vera e estou avaliando o seu pôster. 

A seguir colocarei algumas perguntas/sugestões

• Você comenta que esses agregados podem ser transmitidos para outras células, quais seriam os mecanismos utilizados?
• Os autores pretendem realizar ensaios de apoptose?
• Como fariam uma melhor caraterização desses agregados? assim como pretendem avaliar que não corresponde à formação amieloide?

Como sugestâo a maneira visual e entendemento com amior facilidade dos resultados, sugiro invertir a ordem dos resultados (primeiro a célula não mutada e depois a mutada)

Por que os autores identificam os linfócitos B na figura 2 como IgM+ e B220+ e na figura 4 utilizam a marcação para CD19?

Prezada Thayssa,

Parabéns pelo trabalho. Gostaria de saber se vocês chegaram a avaliar o IC50 do LQB471. Além disso, também se vocês realizaram algum outro método para avaliar a viabilidade celular e se chegaram a analisar a proliferação celular.

Gostaria de sugerir o uso da linhagem celular PNT2, pois trata-se de uma linhagem de próstata humana saudável e seria um melhor controle do que as células VERO.

Obrigada, Juliana Echevarria Lima

Boa tarde Anna, 

Você sabe por que este tipo de câncer é mais frequente em homens? Parabéns pelo seu trabalho!

Oi Mariane,

excelente trabalho, parabéns! Sobre o teste de MTT, me chamou atenção que quanto mais tempo, independente do tratamento, as células continuam a replicação. Não há efeito tempo dependente, ou a partir de 72h é que se observa efeito. O clonogênico foi feito em 72h para equiparar efeito do mtt? Tentou fazer outras concentrações e tempos maiores? Vc ainda não fez os ensaios de ROS certo? Como ficaria a estabilidade dessas partículas in vivo?

Att

Giselle Faria Lopes (lembro da sua dissertação há um tempinho atrás..rs)

Como aluno de iniciação científica, quais foram suas atividades no projeto e nestes resultados?