Proceedings of Oncobiology Symposiums
Proceedings of XIV Oncobiology Symposium

Isabel,

quais são as perspectivas com relação aos resultados que você obteve ate o momento?

Você comenta que observou diferenças no perfil químico, dependente do periodo da coleta e da quantidade de material de A. halophytica.

Que fatores você inclui em "periodo da coleta"? Epoca do ano, horário do dia de coleta..?

Vocês pretendem complementar o estudo para inferir um momento e concentração ideal para garantir que o extrato tenha o efeito anticancer?

Boa tarde Isabel,

* Parabéns pelo trabalho! Em relação à figura 1, qual foi o controle utilizado para esses ensaios de MTT?

* Qual foi a concentração utilizada nos experimentos de ciclo celular (Figura 2)?

* Ao que você atribui essa variabilidade das espécies nas três coletas diferentes? Qual foi o período de coleta e como pode afetar a ocorrência das espécies?

* A atividade anti-tumoral da A. halophytica foi eficiente na célula de câncer de mama somente ou na célula de mama e na de glioblastoma também? Qual célula MDA é essa? Especifique, por favor.

* Essa variabilidade química avaliada significa que os compostos são o que, exatamente? Metabólitos das cianobactérias com atividade anti-tumoral? Vocês pretendem avaliar/validar quais desses compostos (isolados ou em combinação) são os responsáveis pelos efeitos anti-tumorais? Vocês pretendem escolher um modelo de câncer para seguir com o trabalho? 

Olá Isabel, boa tarde!

Parabéns pelo trabalho desenvolvido!

O efeito citotóxico desta cianobacteria já foi anteriormente avaliado para outros tipos de câncer?

Porque você escolheu estudar esses 4 tipos como modelo (glioblastoma, pulmão, leucemia e mama)? 

Olá, Isabelle. Tudo bem? 

Meu nome é Paula, eu sou pós-doutoranda no INCA e gostaria de te fazer algumas perguntas.

Primeiramente, eu achei o seu trabalho muito interessante e relevante. Precisamos entender melhor essa doença que acomete tantas mulheres. Eu vi que 72 estudos foram excluídos de acordo com os critérios de exclusão, mas senti falta de ter um detalhamento na sua figura sobre quantos estudos foram excluídos por serem revisão, quantos não envolviam GWA, de acordo com cada critério descrito na metodologia. Minha sugestão é acrescentar essa informação mais detalhada ao seu "flowchart". 

Eu fiquei com algumas dúvidas e curiosidades: 

1. Você mencionou que a seleção dos controles variou entre os estudos. Quais foram os critérios utilizados pelos estudos? Essas variações podem influenciar os resultados obtidos pelo estudo ou acrescentar algum tipo de viés?

2.Das principais alterações moleculares que vocês identificaram após a revisão sistemática, alguma delas está envolvida com câncer de ovário?

3. Vocês pretendem fazer uma meta-análise desses dados?

Mais uma vez, parabéns pelo seu estudo. 

Obrigada,

Paula. 

Boa tarde Lucas Ricardo,

Parabéns pelos seus resultados. São muito bonitos e empolgantes. Eu vi seu pôster, e fiquei com uma dúvida. Em relação aos marcadores específicos que definem o fenótipo das células tumorais (SS; monofásico ou bifásico), quais marcadores vocês utilizaram no estudo?

Qual foi o experimento (metodo) de viabilidade celular usado?

Por que selecionou a irradiacao de 35 e de 70 joules/cm2?

Tentou realizar aumento gradual (ou um gradiente) da intensidade de irradiacao do laser ate chegar em 70 J/cm2?

Primeiro, parabéns pelo trabalho! Prefiro fazer todas as perguntas em um único tópico, assim facilitamos o processo. 

1 - Há quanto tempo você vem desenvolvendo esse projeto de pesquisa?

2 - Ficou clara que a escolha da linhagem BT474 se deu por conta da presença de HER-2, porém sabemos que outros mecanismos moleculares podem estar ou não associados à resposta a drogas alvo. Você saberia dizer se esta linhagem apresenta outras moléculas que auxiliariam ou dificultariam a resposta ao Trastuzumab (por exemplo, p53 selvagem , PTEN mutado, etc)?

3 - Dentre as vias alteradas nas análises proteômicas os autores discutiram que as vias relacionadas à adesão celular estão sendo moduladas pelo tratamento. Mas não ficou claro se elas estariam sendo positiva ou negativamente reguladas. O que estaria acontecendo com a adesão celular, no caso da linhagem BT474, após o tratamento com o Trastuzumab? E vocês pensam em avançar nos estudos em outras vias também moduladas pelo tratamento ou focariam apenas na adesão celular?

Boa tarde, Michelle!

Parabéns pelo trabalho!

Verificando o resumo e o pôster, notei que não foi apresentado os resultados da PFK e da PK. Além disso, a figura 3 não possui informações sobre qual o teste que está sendo avaliado pela citometria de fluxo, e o que significa as barras pretas, brancas e cinzas.

Foi realizado o ensaio de MTT com as células MDA-MB-231 tratadas com a tintura no modelo 2D, antes de partir para o modelo 3D?

Na figura 4-A, o MTT demonstra que A-V e Q-V reduziram significativamente a viabilidade, porém na figura 4-B, é mostrado os resultados com A-I e P-I, que não reduziram a viabilidade.

Qual foi a sua participação efetiva na obtenção dos resultados? E quais são os próximos passos?

Como o modelo estatístico leva em consideração a variação de temperatura do equipamento utilizado no tratamento? 

Propagação de luz nas camadas da pele, foram de quais comprimento de onda? LED? LASER? 

Boa tarde!

Quais seriam os próximos passos experimentais a serem tomados com objetivo de entender melhor as caracteristicas dessa celulas no microambiente do melanoma? Se você tivesse que convencer por ex o Instituto Serrapilheira a financiar seu estudo o que proporia?

Olá Danilo,

Boa Tarde! Parabéns pelo seu pôster.

Seguem algumas perguntas.

1- Há quanto tempo você está no Doutorado?

2 - Poderia explicar melhor sobre os derivados mesoiônicos?

3 - Quais os efeitos biológicos desses derivados serão avaliados no estudo?

Obrigada

Paloma Souza

Como os autores explicam a dualidade de TOB2 em termos proliferativos?

Olá! Parabéns pelo trabalho!

Gostaria de saber se esse composto já foi testado nessas linhagens? Já foi avaliado frente a células não tumorais? Além disso, pretende avaliar em modelo animal? Seria a continuação do seu trabalho? Se não, o que pretende fazer a partir de agora?

Obrigada!

* Vocês viram que o C-PC não se liga à p53 e, além disso, ele se liga a BCL-2, entretanto os ensaios in vitro mostraram que C-PC não induz morte celular. O que você acha que pode estar acontecendo? 

* O que é a célula controle? É tratada com algum reagente?

* Essa molécula C-PC já é utilizada em algum ensaio clínico como agente anti-tumoral em algum modelo? E em ensaios in vivo, há estudos que utilizam a P-CP em camundongos? Se sim, sabe a concentração utilizada in vivo? Essa concentração de 400 ug/mL é viável?

* No gráfico A do ensaio de sensibilidade da célula tumoral B16F10 ao P-CP, ficou faltando o asterisco indicando diferença estatisticamente significativa entre o controle e a célula tratada com 400 ug/mL em 72h, ou não colocou porque não há diferença significativa? No próprio abstract você chama a atenção para esta concentração...

* Como você sabe que essas interações proteína-proteína (in silico) entre C-PC e BRAF, MEK1, BCL-2, CDK6 etc... bloqueiam as ações dessas proteínas? 

* Como foi feita exatamente a contagem das células com a exclusão com azul de tripan? As células estavam aderidas? Como você extrapolou essa contagem para todo o poço?

* Como pretendem validar os experimentos com as metaloproteinases?

Não seria interessante comparar o resultado com uma droga referência já que você está fazendo o screening de candidatos a farmacos antitumorais? Se tiver é claro!

Boa tarde Pedro, meu nome é María Gabriela Vera e estou avaliando o seu pôster.

A seguir colocarei algumas perguntas/sugestões sobre o trabalho. 

• Vocês pretendem estudar os diferentes tipos de macrófagos? já que existe diferenças especialmente funcionais entre eles 
• Consideraram avaliar as CD8  sozinhas e em conjunto com o PD1? e assim observar se estas teriam um impato na resposta
• Consideraram avaliar as populações por IHQ e assim observar a distribuição do nicho. Isto poderia responder algumas dúvidas sobre a interação das células, em especial com as Foxp3PD1+ 
• Quais seriam os seguintes experimentos a ser desenvolvidos?

Parabéns pelo seu trabalho, muito interessante

Bom dia, 

gostaria de  parabenizar o estudo e fazer algumas perguntas.

Você acrescentaria alguma metodologia ao seu estudo, qual seria o próximo passo diante do seu resultado? 

Você tem conhecimento de alguma outra molécula com APE1 como alvo que poderia ter o mesmo efeito?

Boa tarde, Israel!

Verificando o resumo, o pôster e a sua apresentação, notei que não foi apresentado nenhum resultado. O trabalho está no início?

Quais os compostos que serão utilizados nas nanopartículas?

Como você pretende realizar ensaios in vivo, será avaliada a toxicidade em camundongos (verificação da pelagem dos animais, peso e alguns marcadores bioquímicos)?

Qual será a sua participação efetiva na obtenção dos resultados?

Que tipos de testes pretende fazer para avaliação da morte celular?

A que atribui o resultado com o MB1? Estrutura?

Boa tarde, Luiz!

Parabéns pelo trabalho e apresentação!

Gostaria de saber qual o número máximo de sessões por tratamento? Qual foi a sua participação efetiva na obtenção dos resultados? E quais são os próximos passos?

Boa tarde Giulia. Meu nome é María Gabriela e estou avaliando o seu pôster. 

A seguir colocarei algumas perguntas/sugestões sobre o seu trabalho:

• Qual foi o motivo de diminuir a concentração dos componentes de 10uM para 5 uM em algum dos ensaios?
• Os resultados sugerem que o RCP18 não reativa à P53 mutante, porque ainda decidiram continuar realizando experimentos com este composto e não ficar unicamente com RCP17? De fato, é observado no resultado de p21
• Por que usar no ensaio de p21 a concentração de 10uM e não a de 5uM? Será que esse resultado seria mantido na concentração menor
• Está escrito no resumo a realização de ensaio de 3D, quais seriam os experimentos a ser desenvolvidos usando este modelo ?
• Quais seriam os experimentos a ser realizados futuramenter? uma opção poderia ser a realização de um proteoma para ver os efeitos em outras proteínas/vias de uma maneira mais geral.
• Quantas vezes foi repetido o ensaio de p21? Vale a pena fazer o teste estatístico.

Parabéns pelo seu trabalho

Olá! Parabéns pelo trabalho e pela apresentação!

Gostaria de saber para onde vai seu trabalho agora. Você pretende avaliar se os achados se repetem em células de tumores de pacientes? E avaliar as alterações especificas que ocorrem nos CAFs, seria possível?

Obrigada!

Uma vez que a isoforma OPNA apresenta-se superexpressa em Linhagens de câncer colorretal contribuindo para a progressão desse tipo de tumor, quais próximos passos podem ser utilizado para para reverter esse cenário ? 

Olá! Parabéns pelo trabalho e pela apresentação!

Gostaria de saber se esse composto já foi testado em outras linhagens de câncer de mama triplo negativo. Se sim, os resultados são semelhantes? Além disso, ele já foi avaliado em modelo animal? Seria a continuação do seu trabalho? Se não, o que pretende fazer a partir de agora?

Obrigada!

Oi Brenda, parabés pelo excelente estudo! Poderia me falar melhor sobre como vocês fazem o teste de viabilidade por alamar blue por favor?

Att

Giselle Faria Lopes

Qual a concentração de Trastuzumabe utilizada no tratamento das linhagens nos experimentos de análise de integrina B1? Qual o seu efeito na viabilidade dessas linhagens? E qual seria a concentração utilizada na clínica?

Olá Larissa,

Boa Tarde! Parabéns pelo seu trabalho. 

Tenho algumas dúvidas. Seguem as perguntas.

1- Há quanto tempo você está no Doutorado?

2 - A análise in vitro utilizando MCF7 foi através de qPCR. Não seria necessária a avaliação proteica para afirmar um fenótipo triplo negativo nesta linhagem?

3- Vocês pretendem avaliar o efeito de 5-HT em uma linhagem com fenótipo mais agressivo, como MDA-MB-231 ou outra?

4- Como vocês pretendem validar as alterações fenotípicas induzidas por 5-HT e por fluoxetine?

Obrigada

Paloma Souza

Gostaria de saber se pretende testar esses compostos em outros tipos de tumores que também apresentem mutação em p53?

A linhagem bt-474 é HER-2 positiva? Qual é a expressão do receptor comparado com outras linhagens mamárias?

Bom dia,

muito legal o trabalho! Parabéns! Pode explicar um pouco melhor como é feito o teste de estabilidade por MTT por favor?

Att

Giselle Faria Lopes 

Gostaria de saber se sendo obtido de pacientes de cirurgias plásticas também não teriam um certo nível de sobrepeso? E neste caso apresentarem já um nível de citocinas pró-inflamatórias?

Estas substâncias são protótipos candidatos a fármacos ou já são compostos utilizados em ensaios clínicos?

Boa tarde Mariana,

Meus parabéns pelo trabalho, gostei muito da sua apresentação. Você fez análises in silico para determinar os possíveis alvos moleculares de C-PC e verificou que esta proteína se liga a algumas proteínas relacionadas à proliferação, apoptose, migração e metástase; e verificou também que esses efeitos funcionais ocorrem, através de alguns experimentos in vitro. O que mais você faria para corroborar esses experimentos in vitro? Quais são as perspectivas desse trabalho?

Quais serão os próximos passos uma vez descoberta as proteínas alteradas com transtuzumab?

Boa tarde meu nome é María Gabriela Vera e estou avaliando o seu pôster. 

A seguir colocarei algumas perguntas/sugestões

• Você comenta que esses agregados podem ser transmitidos para outras células, quais seriam os mecanismos utilizados?
• Os autores pretendem realizar ensaios de apoptose?
• Como fariam uma melhor caraterização desses agregados? assim como pretendem avaliar que não corresponde à formação amieloide?

Como sugestâo a maneira visual e entendemento com amior facilidade dos resultados, sugiro invertir a ordem dos resultados (primeiro a célula não mutada e depois a mutada)