Produtos derivados do trigo como farinha e massa alimentícia são bastante consumidos, devido às propriedades nutricionais e aceitabilidade. O desoxinivalenol (DON) é uma micotoxina produzida por fungos do gênero Fusarium, contaminante natural de cereais, particularmente do trigo. Os efeitos agudos produzidos pelo DON são: náusea, vômito, diarreia, dor abdominal, dor de cabeça, tontura e febre. Os limites máximos atualmente permitidos pela legislação no Brasil e na Comunidade Europeia são de, respectivamente, 1750,0µg/kg (RDC nº7/2011) e 750,0µg/kg (EC nº1881/2006). O objetivo deste trabalho foi verificar a contaminação de DON em amostras de farinha de trigo (30) e de massa alimentícia instantânea (40), comercializadas na cidade de São Paulo, entre agosto/2010 e março/2011. O DON foi extraído das amostras utilizando água deionizada e, para isolamento e limpeza, colunas de imunoafinidade foram empregadas. Realizou-se a quantificação por padronização externa em cromatógrafo a líquido com detector UV (220nm). Quanto às amostras de farinha de trigo, 29 (96,7%) estavam contaminadas, com níveis entre 34,3-885,9µg/kg. Já entre as amostras de massa alimentícia, 39 (97,5%) estavam contaminadas, com valores entre 35,5-1609,0µg/kg. Pode-se verificar a alta incidência de contaminação por DON nestes alimentos. Considerando que o Brasil é o terceiro maior produtor mundial de massas alimentícias e que existem, na literatura nacional, poucos dados publicados sobre o assunto, é essencial a realização de estudos de monitoramento para verificar a presença desta micotoxina em trigo e subprodutos. Assim, os produtores poderão se adequar à legislação, garantindo alimentos seguros e de boa qualidade para a população.