EVALUATION OF CAS9 PROTEIN EXPRESSION USING BL21(DE3) AND BL21(DE3) ROSETTA E. COLI STRAINS

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Resumo

O trabalho tem por objetivo avaliar a expressão da proteína Cas9 em duas cepas diferentes de Escherichia coli, as cepas BL21(DE3) e BL21(DE3) Rosetta. A cepa Rosetta foi escolhida por ser uma cepa modificada geneticamente para a expressão de proteínas recombinantes que apresentam códons raros na sequência do seu gene, como é o caso da proteína Cas9. Foram avaliadas diferentes condições de cultivo e indução. Os resultados indicaram que a expressão da proteína Cas9 foi maior ao empregar a cepa BL21(DE3) quando comparada à cepa BL21(DE3) Rosetta, indicando que neste caso a presença de códons raros não teve efeito significativo na expressão da proteína Cas9 em E. coli.

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Instituições
  • 1 Departamento de Engenharia Química / Escola Politécnica / Universidade de São Paulo
Eixo Temático
  • 2. Biotecnologia na Produção de Fármacos
Palavras-chave
Cas9 nuclease
recombinant protein expression
Escherichia coli
bioprocess
rare codon