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PARÂMETROS CINÉTICOS RESPIRATÓRIOS E DE CRESCIMENTO DE Escherichia coli RECOMBINANTE DURANTE A PRODUÇÃO DE P(3HB)

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Os PHAs são uma família de polímeros biodegradáveis que são considerados uma alternativa futura aos plásticos convencionais. O P(3HB) é o PHA mais estudado. Técnicas de engenharia genética vêm sendo desenvolvidas em Escherichia coli, uma bactéria naturalmente não produtora de PHAs e geneticamente bem caracterizada, sendo por isso muito usada para técnicas de DNA recombinante. Porém, antes de se submeterem linhagens a essas técnicas, é necessário que elas sejam bem caracterizadas. Desta forma, no presente trabalho, estudou-se os parâmetros cinéticos respiratórios e de crescimento da bactéria E. coli DH5α selvagem e com a inserção do plasmídio pBHR68 para a biossíntese de P(3HB) de Cupriavidus necator. As velocidades específicas máximas de crescimento foram de 0,79 h-1, para a cepa selvagem, e 0,27 h-1 para a recombinante. Os fatores de conversão de oxigênio em células (YX/O) foram de 3,94 e 1,65 (g.g-1) e as velocidades específicas de consumo de oxigênio para manutenção celular (mo) foram 52,59 e 25,72 (g.g-1.h-1) para E. coli DH5α e E. coli DH5α/pBHR68, respectivamente. O acúmulo de P(3HB) em E. coli recombinante foi de 56 %. A inserção do plasmídio pBHR68 em E. coli DH5α afetou o desempenho celular, visto a diferença dos parâmetros cinéticos de crescimento e de respiração microbiana da bactéria antes e depois da transformação. O levantamento desses tipos de dados auxiliam o estabelecimento de condições de cultivo para estudos posteriores.