A ação sinérgica de lipases com diferentes regiosseletividades pode melhorar a transesterificação de óleos vegetais e gorduras, aumentando o rendimento de produção de biodiesel e reduzindo o tempo de reação. Assim, neste trabalho avaliou-se a transesterificação de óleo de soja com etanol catalisada por uma mistura de lipases nas formas solúvel e imobilizada. Para esse fim, lipases de Thermomyces lanuginosus (LTL) e de pâncreas de porco (LPP) foram individualmente ou simultaneamente agregadas e precipitadas na presença de proteína de soja como agente espaçador e entrecruzadas com glutaraldeído, sendo os biocatalisadores nomeados de CLEAs ou combi-CLEAs, respectivamente. Os resultados mostraram um incremento de até três vezes no rendimento da transesterificação de óleo de soja com etanol usando combi-CLEAs de lipases (50% de LTL e 50% de LPP), em comparação com a mistura das lipases solúveis. Após 8 h de reação obteve-se um rendimento de transesterificação de 60,7%, atingindo em torno de 90% após 30 h.