Caracterização da β-Galactosidase Imobilizada em Immobead 150

Introdução: A β-galactosidase é responsável por catalisar a hidrólise da lactose, e sua aplicação em laticínios é cada vez mais explorada. O emprego desta enzima, além de contribuir com o dulçor, solubilidade e sabor, permite o desenvolvimento de produtos isentos, ou com teores reduzidos de lactose. A imobilização de enzimas permite a recuperação destas do meio reacional, propondo o desenvolvimento de técnicas para a sua reutilização e maior estabilidade. O Immobead 150® é um suporte comercial que contém grupos epóxi em sua região superficial e apresenta alta hidrofobicidade e estabilidade térmica, podendo contribuir para o processo de imobilização. O objetivo desse trabalho foi estudar a imobilização da β-galactosidase de Aspergillus oryzae em Immobead 150®. Métodos: O suporte foi submetido a modificações químicas com mistura ácida de H2SO4 e HNO3 (Immobead-Ác) ou com glutaraldeído (Immobead-Glu). Avaliou-se o processo de imobilização da β-galactosidase no Immobead sem modificação (Immobead) e submetido aos tratamentos (Immobead-Ác e Immobead-Glu), analisando o efeito de diferentes cargas de enzima (10 a 500 mg de proteína/g de suporte). Durante o processo, coletas periódicas verificaram o rendimento e a eficiência da imobilização. Os derivados com os melhores parâmetros foram aplicados na hidrólise da lactose de uma solução desse açúcar e do permeado de soro. Resultados: Verificou-se que não houve redução significativa nos rendimentos de imobilização obtidos para as cargas de até 100 mg de proteína/g de suporte, cujos valores foram de 63,36; 88,73 e 78,48% para Immobead-Ác, Immobead-Glu e Immobead, respectivamente. Em relação à eficiência, todos os derivados apresentaram valores superiores a 70%. Na hidrólise na solução de lactose ou do permeado de soro cada um dos três derivados foi reutilizado 35 vezes. Conclusões: Entre os tratamentos testados na imobilização da enzima β-galactosidase de A. oryzae em Immobead, os derivados modificados com glutaraldeído apresentaram os melhores rendimentos e maior reusabilidade.