Cultivo do Trichoderma spp. para Produção das Enzimas Celulases e Xilanases em Bagaço de Malte

Enzimas microbianas extracelulares estão envolvidas em vários processos biotecnológicos importantes, como na indústria têxtil, produção de cerveja, vinho, pão e papel e celulose. Diversas espécies de fungos filamentosos são utilizadas para produção de enzimas, com destaque para o gênero Trichoderma, esses microrganismos são capazes de aproveitar materiais lignocelulolíticos como fonte de carbono na sua produção. O Brasil como país agrícola contribui com muitos resíduos agroindustriais que podem ser utilizados para cultivo microbiano e produção de moléculas com alto valor agregado como as enzimas, entre eles o bagaço de malte amplamente produzido e ainda pouco explorado. O objetivo deste trabalho foi avaliar a produção de celulases e xilanases por Trichoderma spp em bagaço de malte (BM), por fermentação submersa. Métodos: O BM foi gentilmente cedido pela Cervejaria Spoller (Londrina-PR), seco em estufa a 70 ± 5 °C, por 4 dias e armazenado em temperatura ambiente. Os cultivos foram desenvolvidos em Erlenmeyers de 125 mL contendo 25 mL de meio de Vogel e 0,375 g de BM, na presença e na ausência de glicose 1 %. O inóculo consistiu de 500 µL de suspensão de conídios contendo 107 a 108 UFC mL-1 e incubados por 96 h a 28 ± 2 °C com agitação de 180 rpm (BMA) e estáticos (BME). A interrupção se deu por centrifugação a 9.000 rpm por 15 min. O extrato bruto enzimático (EBE) obtido foi utilizado para as determinações de atividade enzimática, pH (inicial e final), açúcares totais, açúcares redutores e proteínas totais. O material sólido fermentado (MSF) residual teve seu peso seco determinado. Resultados: A atividade celulásica nos cultivos com glicose foi de 0,286 U/mL (BMA) e 0,272 U/mL (BME), já nos cultivos sem glicose foi obtida 0,192 U/mL (BMA) e 0,149 U/mL (BME). A atividade xilanásica média foi 0,023 U/mL, 12 vezes menor que a celulásica, nas diferentes condições avaliadas. A concentração dos açúcares totais e redutores foram sempre menores nos frascos cultivos em comparação aos controles e as proteínas totais e o pH final apresentaram valores sempre superiores nos cultivos agitados comparados aos controles. O MSF determinado por peso seco foi menor nos cultivos agitados e maior nos cultivos estáticos. Conclusões: O fungo Trichoderma spp. foi capaz de crescer na presença de BM e produziu as celulases e xilanases, com preferência à celulase, a agitação também favoreceu esta atividade. O MSF foi consumido de forma mais eficaz nos cultivos agitados. Os resultados sugerem que novas avaliações devem ser realizadas para investigar melhor o potencial do microrganismo na produção de celulases entre eles a avaliação de novos parâmetros de cultivo seguidos da otimização para produção dessa hidrolase pelo Trichoderma spp assim como a sua identificação em nível de espécie.