CHARACTERIZATION OF AN ECTO-5’NUCLEOTIDASE (CD73) ACTIVITY IN BREAST CANCER CELLS AND ITS POSSIBLE PARTICIPATION IN METASTATIC PROCESSES

INTRODUÇÃO E OBJETIVO: A ecto-5'-nucleotidase (CD73) hidrolisa 5'AMP em adenosina e fosfato inorgânico. As células do câncer de mama (MDA-MB-231) expressam altos níveis de CD73, e descobriu-se que essa enzima desempenha um papel promotor de tumores no câncer de mama. No entanto, nenhum estudo buscou investigar se o CD73 tem afinidade diferencial ou preferências de substrato entre células mamárias cancerosas e não cancerosas. No presente estudo, objetivamos caracterizar bioquimicamente a ecto-5'-nucleotidase em linhagens de células de câncer de mama e avaliar se sua função catalítica e progressão tumoral estão correlacionadas em células de câncer de mama. MATERIAL E MÉTODOS: Para medir a atividade da ecto fosfohidrolase, o Pi liberado foi medido usando a metodologia de Fiske-Subbarow. RESULTADOS E CONCLUSÃO: Os resultados mostraram que, em comparação com células mamárias MCF-10A não tumorais, as células de câncer de mama triplo-negativo MDA-MB-231 apresentaram maior nível de expressão de ecto-5'-nucleotidase e atividade enzimática. Embora a atividade de ecto-5'-nucleotidase na linhagem celular MDA-MB-231 não tenha mostrado seletividade entre substratos monofosforilados, 5'AMP foi preferido pela linhagem celular MCF-10A. Em comparação com a linhagem celular MCF-10A, a linhagem celular MDA-MB-231 tem melhor capacidade hidrolítica, menor afinidade de substrato e alto potencial inibitório após tratamento com um inibidor específico de CD73 α,β-metileno ADP (APCP). Portanto, demonstramos que um inibidor específico da ecto-5-nucleotidase reduziu significativamente a capacidade migratória e invasiva das células MDA-MB-231, sugerindo que a atividade da ecto-5-nucleotidase pode desempenhar um papel importante na progressão metastática.