METABOLIC PROFILE OF TUMOR SKIN CELLS AFTER LOW-LEVEL LASER THERAPY

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Details
  • Presentation type: IC - Undergraduate Students
  • Track: Genomics, Proteomics and Metabolomics
  • Keywords: Metabolomics; low-level laser therapy; LLLT; respirometry;
  • 1 Universidade Federal do Estado do Rio de Janeiro
  • 2 UNIVERSIDADE DO ESTADO DO RIO DE JANEIRO

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Abstract

INTRODUCTION AND OBJECTIVES: Low-level laser therapy (LLLT) is currently considered a safe and effective way for the clinical treatment of a wide range of diseases, mainly in the treatment of skin lesions and pressure ulcers, as well as for aesthetic purposes. However, evidence shows that the use of LLLT in some pigmented lesions can lead to melanomas or contribute to tumor growth. The cellular and metabolic mechanisms associated with skin cell photobiostimulation are not yet fully understood. The NMR metabolomics showed tremendous potential assembling a complete picture of integrated metabolic changes, identifying many intermediary metabolites. Our goal is to evaluate the metabolic effects of LLLT in normal and tumor skin cells. In addition, we intend to investigate the possible cellular and molecular changes in these cells. With this study, we intend to elucidate the metabolic pathways that would be associated with the differentiation, proliferation and viability of skin cells, thus contributing to the development of more suitable therapies for dermatoses. MATERIAL AND METHODS: Analyze the profile the metabolic profile of the MV3 and NGM cells in the 24h, 48h, 72h and 96h times. The irradiation with red laser was performed at a fluency of 35-70J/cm², with a wavelength of 660nm and power of 100mW. Subsequently, cell proliferation, metabolomics and high resolution respirometry tests were performed.
RESULTS AND CONCLUSION: LLLT can increase the viability of metastatic invasive melanoma cells. Normal skin cells showed a metabolic profile similar to the tumor when irradiated with 70J/cm2. Melanomic cells reduce glycolysis after laser irradiation with high fluency.

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Sulamita Rocha

Olá! Vamos por partres!
1)Para verificar a viabilidade usamos o teste MTT.

2)Selecionamos essas duas intensidades pois usamos o protocolo de úlcera de pressão, do aparelho Photon Laser III, que possui bandaas espectrais conhecidas como Safe-band, onde não apresentam risco ou alteração genética para o paciente. Além disso, elas foram desenvolvidas para bioestimulação, por isso as escolhemos.

O que ja responde a última pergunta, de por isso que não fizemos um teste aumentando as intensidades gradualmente, usamos as bandas especificas para úlcera de pressão (35 e 70J/cm2)

Dario Eluan Kalume

Oi Sulamita,

Obrigado pela sua resposta bastante esclarecedora. Porem tenho mais dois comentarios/questoes:

1) Nos dois graficos de espectro de RMN nao ha legendas (assim como o grafico de barras de resultados de MTT). Isso torna um pouco confuso a compreensao do poster para o leitor.

2) Nao entendi a razao pela qual tu nao mostras no poster os resultados dos experimentos de 24, 48, 72 e 96 horas, ja que eles sao mencionados em Material and Methods.

Obrigado 

Author

Sulamita Rocha

A legenda do espectro ficou acima, mostrando qual é o tipo de célula usada (MV3) e o tempo que foi analisada (1h após a irradiação). E ao lado, dizendo qual a cor respectiva de cada irradiação - 35 (linha preta) e 70J (linha vermelha). Além disso o trabalho ainda não possui um N grande, por isso os resultados dos outros tempos não foram adicionados. Esses são só os resultados preliminares.

Mas obrigada pelo aviso, me atentarei nas proximas apresentações, esta foi apenas a minha primeira.

Dario Eluan Kalume

Sim, muito obrigado

Author

Sulamita Rocha

Olá, boa tarde!
O trabalho busca justamente elucidar as vias metabólicas, então sim, iremos repetir os testes para as células normais já que os resultados foram bastantes curiosos sobre o perfil metabólico da cel normal (NGM) irradiada a 35J ser parecido com o de uma cel tumoral (MV3) irradiada com 70 J/cm2. Iremos realizar os mesmos testes nas duas células e com os dois tratamentos.

Ainda não temos indicios do que leva a esse perfil, só o que está na literatura. A intenção é justamente desvendar essas vias e processos responsáveis por esse efeito.

Author

Sulamita Rocha

Sim, estavam confluêntes

Não testamos níveis diferentes de confluência. 

Author

Sulamita Rocha

Um OBS: para os ensaios de metabolômica elas costumam estar 80% confluentes, para os outros ensaios ainda não padronizamos.

Denise de Abreu Pereira

Ok obrigada pelas respostas Sulamita!