PARTITIONING COLLAGENOLYTIC ENZYME FROM CICHLA OCELLARIS USING AQUEOUS TWO-PHASE SYSTEMS (PEG-PHOSPHATE) AND APPLICATIONS OF PEPTIDES FOR PHARMACEUTICALPURPOSES

Uma protease colagenolitíca obtida a partir de Cichla ocellaris foi extraída por sistema de duas fases aquosas (SDFA)- polietilenoglicol (PEG)/fosfato. Para este fim, um planejamento fatorial 24-completo foi utilizado usando massa molar de PEG, concentração de PEG, concentração de fosfato e pH como variáveis ​​independentes, tendo o fator de purificação (FP), coeficiente de partição (K) e rendimento de atividade (Y) como respostas. O SDFA foi composto de PEG em concentrações de 12,5, 15,0 e 17,5% (p/p) e fosfato a concentrações de 10,0, 12,5 e 15,0% (p/p). Os melhores resultados de extração (K: 3,57, Y: 119%, FP: 8,24) foram obtidos no pH 8,0 usando 17,5% (p/p) de PEG 8000 e 15,0% (p/p) de fosfato. A temperatura ótima da enzima foi de 55°C, com atividade ideal a pH 7,5. A enzima foi ativada por Ca2+ e inibida por Zn2+, e teve sua atividade reduzida quando exposta a PMSF e TLCK, tendo conseguido clivar o colágeno do tipo I, sugerindo potencial na produção de peptídeos.