Como importante indicador de qualidade microbiológica da água destaca-se o gênero Enterococcus. Os Enterococcus spp. são cocos Gram-positivos ubíquos podendo ser isolados a partir de fontes ambientais como a água, mas também podem ser indicadores de contaminação fecal. O gênero Enterococcus tem emergido como agente etiológico de infecções nosocomiais, tais como infecções do trato urinário e endocardite, o que é relacionado à multirresistência a antimicrobianos. O estudo teve como objetivo isolar Enterococcus spp. da água coletada do Ribeirão Cambé para obter o perfil fenotípico e genotípico destes isolados e avaliar a resistência frente a antimicrobianos. Como metodologia foi realizada coletas em 2014 e 2015 que totalizaram em 5 coletas, feitas em seis pontos do Ribeirão Cambé no município de Londrina – PR, totalizando em 30 amostras. Dessas foram obtidos 120 isolados bacterianos que foram avaliados pelas técnicas de coloração de Gram e teste de catalase, já para o perfil genotípico utilizou-se a técnica de PCR com a identificação dos isolados em nível de gênero e espécie. Do total de isolados, 63 foram identificados como pertencentes ao gênero Enterococcus, destes 10 foram da espécie E. faecium, 9 E. faecalis, 2 E. gallinarum, 8 E. casseliflavus/flavences, 4 E. hirae, 10 E. munditti, 1 E. avium e os demais como Enterococcus spp. A análise da suscetibilidade dos isolados foram testados frente a 8 antimicrobianos sendo eles: Ampicilina (AMP 10µg), Ciprofloxacin (CIP 5µg) Cloranfenicol (CLO 30µg), Eritromicina (ERI 15µg), Norfloxacin (NOR 10µg), Teicoplamina (TEC 30µg), Tetraciclina (TET 30µg) e Vancomicina (VAN 30µg) empregando-se a técnica de disco-difusão em ágar. Nesse teste foi observado um elevado número de isolados resistentes aos antimicrobianos Tetraciclina (TET 30µg) e Eritromicina (ERI 15µg) perfazendo 59% dos isolados. A tetraciclina é um antimicrobiano de amplo espectro sendo comumente utilizado na clínica médica. Além disso a utilização de antimicrobianos de largo espectro contribui para o desenvolvimento de uma pressão seletiva que proporciona o aumento do surgimento de bactérias multirresistentes. Concluiu - se que Enterococcus spp. estava presente em diversos pontos do Ribeirão Cambé, e apresentaram multirresistência a diversos antimicrobianos, podendo levar a sérios riscos a saúde humana e animal.