CARACTERIZAÇÃO DOS MECANISMOS MOLECULARES DE MACRÓFAGOS EM RESPOSTA A Mycobacterium leprae MEDIADOS PELO RECEPTOR PURINÉRGICO P2X7

A hanseníase é uma doença infecciosa crônica causada pelo bacilo Mycobacterium leprae,
transmitido via trato respiratório superior e, que pode acometer as mucosas, pele e nervos. É
classificada pela diversificação no curso clínico da infecção, variando de uma doença
paucibacilar na qual poucos bacilos estão presentes, a uma doença multibacilar, na qual uma
grande carga bacilar está presente nas lesões. M. leprae é uma bactéria gram positiva,
intracelular obrigatória, que infecta, preferencialmente, macrófagos e células de Schwann.
Somente a exposição à micobactéria não é suficiente para a manifestação da doença, o que
pode ser explicado pela dependência de fatores genéticos e imunológicos para determinar
resistência ou susceptibilidade a manifestação da doença. P2X7, receptor expresso na
superfície de macrófagos, tem sido implicado em processos fisiológicos e patológicos na morte
de patógenos intracelulares, tais como Mycobacterium tuberculosis e Toxoplasma gondii, sob
estímulo de ATP extracelular. Recentemente, nosso grupo de pesquisa mostrou uma
associação de susceptibilidade para hanseníase em indivíduos homozigotos para o alelo
mutante do polimorfismo de perda de função no gene P2X7, rs3751143 A>C. Entretanto,
estudos imunológicos são necessários para uma melhor compreensão do papel de P2X7 frente
à infecção por M. leprae. Neste sentido, este trabalho tem como objetivo avaliar a ativação do
receptor purinérgico P2X7 em macrófagos humanos envolvida na resposta a Mycobacterium
leprae. Para tanto, será investigada a resposta imunológica contra M. leprae por macrófagos
humanos obtidos de 30 indivíduos portadores de hanseníase e controles saudáveis, com
diferentes genótipos para o polimorfismo rs3751143 (homozigoto para o polimorfismo,
heterozigoto e selvagem). Serão realizadas culturas de macrófagos infectadas com a cepa de
referência NHDP M. leprae irradiada, obtida do BEI RESOURCES (10 μg/ml) e, tratadas com
ATP, bzATP e oATP para ativação, superativação e bloqueio do receptor P2X7,
respectivamente. Serão avaliados nos sobrenadantes das culturas parâmetros imunológicos (IL-
1β, IL-18, NO, ROS, caspase1 e outras). Além disso, será observada a internalização da
micobactéria irradiada por microscopia óptica através de coloração pelo método de ZiehlNeelsen. Dessa maneira espera-se contribuir sobre a elucidação do papel de P2X7 no contexto
da Hanseníase, esclarecendo os mecanismos imunológicos atuantes no contexto da resposta
por macrófagos portadores de receptor P2X7 funcionalmente deficiente ou não.