Biossurfactantes constituem espécies químicas com propriedades tensoativas similares aos surfactantes sintéticos, entretanto com algumas vantagens como baixa toxidade e possibilidade de produção por fontes renováveis. Entretanto, a vialibidade econômica da produção em escala industrial de biossurfactantes depende de estratégias e processos que visem minimização dos custos, como por exemplo técnicas estatísticas de otimização. O objetivo deste estudo foi analisar os efeitos da agitação e aeração em biorreator de bancada sobre a transferência de oxigênio (kLA) e produção de biossurfactante do tipo lipopeptído pela cepa ICA56, através de planejamento experimental. Dentre as condições analisadas, observou-se que a maior produção de biossurfactante (115 mg.L-1) ocorreu em aeração de 1 L.min-1 de O2 e agitação de 200 rpm e que elevadas condições de aeração e agitação maximizam a transferência de oxigênio, mas podem inibir a produção de biossurfactante e o crescimento celular da cepa.