O objetivo do trabalho foi analisar o biodiesel produzido pela cianobactéria Phormidium sp. empregando dissacarídeos como fonte de carbono orgânico. Os experimentos foram conduzidos em um biorreator de coluna de bolhas. As condições experimentais utilizadas foram: concentração inicial do inoculo de 100mg/L, pH de 7,6, temperatura de 26°C, aeração constante de 1VVM (volume de ar por volume de meio por minuto) e ausência de luminosidade. Como fonte de carbono orgânico empregou-se os dissacarídeos lactose, maltose, sacarose e trealose, em concentrações de 12 g/L. Ao final do cultivo, analisou-se a fração lipídica e a qualidade do biodiesel produzido. Com relação à composição lipídica, em todos os cultivos os ácidos graxos saturados foram predominantes. O biodiesel produzido apresentou enquadramento conforme as normas do Brasil e internacionais, o que demonstra potencialidade do emprego de dissacarídeos no cultivo heterotrófico da cianobactéria Phormidium sp. para produção de biodiesel.