Lipase de Thermomyces lanuginosus (LTL) foi imobilizada em partículas de poli-hidroxibutirato (PHB) para a preparação de biocatalisadores ativos. Neste estudo, foram oferecidos carregamentos de proteína de 0,5 a 100 mg/g de suporte. A adsorção da enzima seguiu o modelo de Langmuir (R2=0,9704). Máxima atividade hidrolítica de 1300 UI/g de suporte e concentração de proteína imobilizada de 26,5 ± 1,80 mg/g foi alcançada. A imobilização da enzima realizada com carregamentos de proteína inferior a 3 mg exibiu hiperativação (atividade recuperada acima de 100%). A enzima livre mostrou máxima atividade hidrolítica em pH 8,0 e 60°C, enquanto que o biocatalisador preparado a pH 7,5 e 65°C. A imobilização aumentou ligeiramente a estabilidade térmica da enzima no intervalo de temperatura entre 30 e 50°C, confirmado por determinação dos parâmetros termodinâmicos energia livre de Gibbs (ΔG), entalpia (ΔH) e entropia (ΔS).