Diferenciação de cromossomos sexuais em rãs paradoxais (Pseudis) desvendada pelo mapeamento do DNA satélite PcP190 e hibridação genômica comparativa

O gênero Pseudis é interessante para o estudo da evolução de cromossomos sexuais, pois Pseudis tocantins é a única espécie desse grupo que detém cromossomos sexuais heteromórficos facilmente reconhecíveis empregando técnicas citogenéticas clássicas. O bloco heterocromático em Wq de P. tocantins apresenta acúmulo do DNA satélite PcP190. Com base na morfologia cromossômica e localização das NORs, é inferido que os cromossomos sexuais de P. tocantins sejam homeólogos ao cromossomo 7 das outras espécies de Pseudis (cromossomo 5 de P. cardosoi). Entretanto, não há evidências adicionais que corroborem essa hipótese nem informação sobre sítios PcP190 no cariótipo de outras espécies de Pseudis além de P. tocantins. Nós mapeamos sequências PcP190 no cariótipo de outras três espécies de Pseudis e empregamos a hibridação genômica comparativa (CGH), usando DNA genômico de fêmeas marcado com FITC-dUTP e DNA genômico de machos como competidor. O mapeamento de PcP190 mostrou sinais de hibridação na banda heterocromática do braço curto dos dois homólogos do par 7 em P. minuta, enquanto em P. bolbodactyla e P. aff. fusca somente um dos homólogos nas fêmeas mostrou sinais de hibridação. Os blocos de PcP190 também diferiram em suas posições intracromossômicas entre as espécies de Pseudis, sendo localizados no braço longo em P. tocantins e P. aff. fusca, enquanto em P. bolbodactyla e P. minuta os clusters estão localizados no braço curto, próximos ao centrômero. Experimentos de CGH confirmam que os cromossomos do par 7 são os cromossomos sexuais em P. bolbodactyla e P. aff. fusca. Nossos dados reforçam a hipótese de homeologia dos cromossomos 7 das espécies analisadas e sugerem o envolvimento de PcP190 no heteromorfismo sexual cromossômico em P. tocantins, P. bolbodactyla e P. aff. fusca. Sugerem também a ocorrência de uma inversão pericêntrica no par 7 na linhagem que deu origem a P. aff. fusca e P. tocantins.