O gênero Bradyrhizobium compreende espécies de grande interesse biotecnológico, capazes de fixar o N₂ da atmosfera e disponibilizá-lo a algumas espécies de plantas, em um processo conhecido por fixação biológica do N₂ (FBN), o que estimula crescimento vegetal e recupera solos com baixa fertilidade. Essas bactérias são chamadas de diazotróficas, e muitas podem se associar a algumas plantas em diversos níveis de interação, sendo a maior contribuição atribuída à simbiose de rizóbios com leguminosas. Algumas dessas estirpes são utilizadas como inoculantes em culturas vegetais visando à substituição dos fertilizantes nitrogenados. Em virtude dessa aplicabilidade, estudos que visam à descoberta e caracterização de rizóbios são de grande importância ambiental e agrícola, e proporcionam descobertas de novas bactérias fixadoras e associações eficientes. Um estudo prévio com 12 estirpes de Bradyrhizobium identificou possíveis representantes de uma espécie nova. Desse modo, o objetivo deste estudo é realizar uma análise polifásica para a definição da posição taxonômica dessas estirpes. Para isso, árvores filogenéticas foram construídas baseadas nas sequencias dos genes 16S RNAr e em genes housekeeping isolados, e concatenados. Foi analisado também o perfil de DNA por BOX-PCR, a identidade nucleotídica (IN) dos genes sequenciados, o Average Nucleotide Identity (ANI) e conteúdo G+C. As análises morfofisiológicas incluíram caracterização das colônias e testes de crescimento em diferentes condições, como diferentes temperaturas, pHs, 2% de ureia e 1% NaCl, além de antibiograma e utilização de fontes de C. O MLSA apontou as estirpes SEMIAs 6399 e 6404 como uma provável espécie nova. A IN entre esse grupo e as espécies relacionadas na sequência concatenada aponta maior semelhança com a espécie B. viridifuturi, tendo 96,1% de semelhança, valor inferior ao considerado de corte para representantes de uma mesma espécie (97%). O perfil de BOX indicou mais de 80% de similaridade entre as SEMIAs e menos de 62% entre as estirpes relacionadas. A SEMIA 6399, escolhida como referência, apresenta 63,99% de conteúdo GC, valor esperado para espécies do gênero, e 91,52% de valor de ANI comparada com a estirpe B. tropiciagri e 91,37% com B. viridifuturi valores abaixo do corte para mesma espécie (95%). As demais análises estão em andamento e devem resultar na descrição de uma nova espécie.